快速繁育

快速繁育是采用体外受精(IVF, in vitro fertilization)技术,通过超数排卵获得大量卵母细胞,并将激活后的精子与卵母细胞进行体外受精,并将胚胎移植入假孕母鼠体内,快速繁育可以根据实验者的需求在更短的周期内得到更多的阳性鼠,以快速扩大繁育规模。

快速繁育的优势

1.降低误差

采用体外受精(IVF)方式进行快速扩繁相当于雄鼠和大量的雌鼠在体外同时交配,保证了出生小鼠周龄的一致性,降低了由于小鼠周龄差异导致的实验误差,实验数据更可靠。

2.节省时间

节省了数月的下游自然扩增育种时间。通常雌鼠需要到6周性成熟才可自然交配,而超排的雌鼠只需4周即可。

3.数量充足

可短时间内获得同周龄超100只小鼠。

4.提升质量

对于微生物污染净化或提高洁净度,IVF可以作为净化手段,选择干净的受体小鼠,净化获得更高洁净度的种群。

快速繁育服务内容

粒成生物可根据客户需求,采用新鲜或者冷冻精子通过IVF方式进行快速扩繁,可快速获得同周龄的100只小鼠,帮客户节省一半时间。

如果是委托粒成生物制备的各种类型的基因敲除、基因敲入、条件性敲除及转基因小鼠项目的下游繁殖,无需提供种鼠,在项目进展到达可进行快速扩繁阶段后,直接进行快速扩繁。如果客户委托的单独的繁殖服务项目,则需要客户给我们提供雄鼠做为种鼠。

小鼠快速繁育和快速繁育周期对比

快速繁育的流程

快速繁育的流程
图1 IVF-ET流程图

快速繁育的步骤

1. 精子获取:成年雄鼠,优先体型健壮、有交配经验的雄鼠,取附睾中的精子,在获能液中扩散。

快速繁育的流程
图2 取精子
精子获能
图3 精子获能

2. 卵子获取:雌鼠超排,从输卵管壶腹部获取卵丘团。

取卵子
图4 取卵子
输卵管
图5 输卵管

3. 体外受精:从获能液滴边缘选取高活力的精子加入卵子培养液中。

挑选高活力精子
图6 挑选高活力精子

4. 洗卵筛卵:去除杂质,清洗受精卵并计数,次日筛选2cell并计数。

早期胚胎
图7 早期胚胎

5. 移植受体:将2cell移植到受体输卵管内。

输卵管移植
图8 输卵管移植